blog

CyTOF让研究人员更深入地了解免疫细胞的复杂性

<p>耶鲁大学的研究人员正在使用CyTOF,它代表飞行时间的细胞计数,探索免疫系统的奥秘为什么一些感染西尼罗河病毒的人会发生威胁生命的感染,而另一些人则不知道他们不仅仅是蚊子叮咬</p><p>耶鲁医学院医学副教授露丝·蒙哥马利(Ruth Montgomery)试图通过使用转化工具进行转化研究,这个医学之谜只是其中一个问题</p><p>它被称为CyTOF,它代表着飞行时间的细胞计数,它为研究人员提供了比以往任何时候都更加深入了解免疫细胞的复杂性</p><p>去年在耶鲁大学成立的CyTOF工具是世界各地研究人员和制药公司估计使用的工具之一“它确实提供了一些优势,”蒙哥马利在耶鲁大学医学院指导耶鲁的CyTOF设施“渴望推进他们发现的研究人员希望使用他们能够使用的最佳技术”利用这项技术,研究人员研究一系列条件 - 从西尼罗河到多发性硬化症糖尿病对癌症的影响 - 可以从相对较小的样本中产生前所未有的细胞数据</p><p>这些数据可以帮助他们识别以前未检测到的细胞亚群,加深对细胞生物学和人类疾病的认识深入研究细胞数据在2009年CyTOF出现之前,科学家们用一种称为流式细胞仪的老技术收集了细胞特征数据</p><p>使用流式细胞仪,研究人员标记细胞组件,如表面标记或蛋白质,荧光探针附着在抗体上并通过激光传递这些细胞当激光照射它们时,荧光探针发出不同波长的光,由细胞计数器检测并转换成可读数据流式细胞仪允许研究人员使用8到10个荧光标记的标记 - 通常是抗体 - 来捕获有关关键细胞特征的数据相比之下,CyTOF采用了一种称为质谱和稀土金属的技术而不是荧光化合物,因此科学家可以使用大约40种标记(并且最多未来100个)这可以转化为四到五倍的信息根据耶鲁大学神经学主席David Hafler博士的说法,他使用标准望远镜观察恒星与天文台质量的折射望远镜之间的差异,他与蒙哥马利合作将CyTOF带到耶鲁大学“它让我可以从看看细胞表面有什么,在细胞内定义功能非常深入,“他说SPADE分析显示了CyTOF技术可以从单个样本中检测到的免疫和非免疫细胞的多个子集搜索细胞线索在CyTOF设施中她指导的是,蒙哥马利将这项技术应用于她的老化如何影响对感染和自身免疫疾病的免疫反应的研究</p><p>她与耶鲁大学的内科和免疫生物学同事一起撰写了一篇论文,发表在2014年的免疫学方法杂志上,该论文展示了该技术能够从少至1,000-10,000个细胞的样本中检测多个信号</p><p>具体来说,她正在使用Cy TOF探索自然杀伤(NK)细胞在对西尼罗河病毒的免疫反应中的作用“现在我们正在研究患有非常严重的西尼罗河病毒的患者的NK细胞和从未知道他们患有西尼罗河病的患者病毒,我们正在描述他们的NK细胞,“她用40个标记组成的小组解释说,蒙哥马利和她的同事已经能够辨别来自两个患者组的NK细胞之间的区别这项研究可能有助于解释免疫反应的差异蒙哥马利指出,感染可能对那些受病最严重的人造成伤害,同样,在他的实验室中,Hafler将CyTOF应用于多发性硬化和癌症等疾病根源的细胞复杂性研究在他目前的一个项目中,他的团队是调查从脑肿瘤中提取的特定类型的免疫细胞“我们正在从脑肿瘤中分离T细胞,”他解释说“我们能够看到超过35种不同的功能性mo T细胞表面的细胞定义其功能“了解多个分子如何在单个细胞中同时发挥功能可能揭示脑肿瘤如何在T细胞存活和生长的过程中发挥作用,他说 “我们越能定义肿瘤如何逃避免疫系统,我们就可以越具体地进行治疗通过观察多种标志物,我们可以更准确地确定治疗前进的方法”关注免疫疗法和预防在他的实验室,免疫学教授Kevan Herold博士利用该技术探索关于1型糖尿病的关键问题,一种自身免疫疾病CyTOF正在帮助他的团队获得更多有关1型糖尿病特异性细胞的数据,这些细胞通常出现在童年时期“我们想要了解导致糖尿病的细胞的目标,“他说”是什么让他们开启</p><p>是什么让他们失望</p><p>是否存在我们可以针对治疗的途径</p><p>这些是我们感兴趣的问题类型“目标不仅是开发免疫疗法来治疗1型糖尿病,而且可能使用这些数据进行预防”有抗原反应性T细胞存在于有风险的个体中1型糖尿病,“Herold说”其中一些人继续患上糖尿病;我们想要做的是弄清楚谁将继续患上糖尿病以防止它“如果他确定了区分患者类型的标记,例如,该发现可能指向预防目标策略,Herold指出Montgomery,Hafler和Herold的工作可能只是冰山一角</p><p>凭借这种更强大的细胞分析工具,耶鲁大学的科学家们现在能够深入分析和分析整个免疫细胞群体的研究</p><p>癌症和其他复杂疾病他们的发现将有助于越来越多的同行评审研究涉及CyTOF,并出现免疫疗法“我们倾向于认为我们对细胞的分析是单维的或二维的现在是40-尺寸,“Herold说”这种方法,你有很多参数,可能会重新定义T细胞群体它将增强我们对免疫谱的看法“出版:Yi Yao,et al, CyTOF支持从少量样品免疫细胞亚群的有效检测”杂志免疫学方法,415卷,2014 12月15日,1-5页; doi:101016 / jjim201410010来源:Ziba Kashef,Yale Univeristy图片:

查看所有